Клиническая диагност ...

Лекция ИССЛЕДОВАНИЕ СИСТЕМЫ КРОВИ

 

Исследование системы крови включает в себя определение ка­чественного и количественного, морфологического (цитологичес­кого), биохимического и биофизического состава крови, исследо­вание костного мозга, селезенки, лимфатических узлов и патоло­гических очагов кроветворения, которые могут образоваться при гемобластозах (ретикулезе, лейкозе).

Гематологические исследования позволяют выявлять субкли­нические заболевания, осложнения; контролировать эффектив­ность лечения; уточнять диагноз и определять прогноз; проводить дифференциальную диагностику; следить за состоянием отдель­ных органов и систем; изучать интерьерные показатели животных. Результаты гематологических исследований приобретают боль­шую ценность в сочетании с общеклиническими и специальными исследованиями.

Родоначальной кроветворной клеткой для всех видов кроветво­рения — эритроцитарного, мегакариоцитарного, лимфоцитарного, моноцитарного и гранулоцитарного является единая полилотентная стволовая кроветворная клетка костного мозга.

Клетки ретикулума, кроветворных органов не образуют родоначальные клетки крови, но они служат необходимым компонен­том, обеспечивая развитие клеток крови.

Моноциты, как и все клетки крови, образуются из стволовых, а не из клеток ретикулоэндотелиальной системы. Выходя за преде­лы сосудистого русла, они превращаются в макрофаги, которые образуют систему фагоцитирующих мононуклеаров (СФМ по классификации ВОЗ, 1972), прежде обозначаемую как ретикуло-эндотелиальная система (РЭС). Лимфоциты периферической кро­ви состоят из Т-лимфоцитов, ответственных за клеточный имму­нитет, и Б-лимфоцитов, участвующих в образовании гуморально­го иммунитета.

Стволовая полипотентная клетка обладает способностью к де­лению (пролиферации) с последующей дифференциацией в опре­деленном направлении. Этот процесс происходит в несколько этапов, а механизм регуляции его сложен.

Полипотентные стволовые клетки на раннем этапе дифферен­циации дают начало двум разновидностям коммитированных, полустволовых клеток-предшественниц — миелопоэза и лимфопоэза, уже частично детерминированным (распознаваемым) в опреде­ленном направлении развития.

На следующем этапе образуются унипотентные клетки-пред­шественницы, дифференцированные в направлении каждого рос­тка кроветворения — эритро-, грануло-, моно-, мегакарио-, лимфо- и плазмоцитарного. Из этих клеток возникают самые молодые морфологически распознаваемые клетки в каждом ростке крове­творения — это бластные клетки, при созревании которых образуются зрелые форменные элементы крови, поступающие в крове­носное русло.

ПОРЯДОК И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ СИСТЕМЫ КРОВИ

 Исследование системы крови включает:

исследование физико-химических показателей крови — опре­деление относительной плотности, скорости свертывания, ретрак­ции кровяного сгустка, вязкости, скорости оседания эритроцитов, их осмотической резистентности, гематокритной величины;

биохимическое исследование — определенные количества ге­моглобина, резервной щелочности, билирубина, общего белка и его фракций, витаминов, макро- и микроэлементов, глюкозы, ке­тоновых тел, липидов, холестерина, ферментов, гормонов;

исследование морфологического состава крови — подсчет ко­личества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, выведение лейкограммы;

исследование костномозгового пунктата — определение коли­чества эритроцитов и миелокариоцитов, гемоглобина и выведение миелограммы;

исследование селезенки;

исследование лимфатических узлов;

исследование функциональной способности органов кроветво­рения.

Выбор методов исследования определяется клиническими на­добностями.

Кровь для исследования лучше получать утром до кормления и водопоя, у жвачных это обстоятельство можно не принимать во внимание.

Если для анализов требуется небольшое количество крови, ее получают из сосудов уха, лапки, кончика хвоста, гребня или сере­жек и т. д. Большее количество крови получают из яремной, кра­ниальной половой вены, вены сафена, подкожной вены предпле­чья, плантарной, подкрыльцевой вены или непосредственно из сердца (у мелких животных, в том числе и птиц).

Относительная плотность крови.Определяют ее ареометрически методами Гаммершлага (в смеси бензола с хлороформом), Мухина (в смеси хлороформа с бензином и керосином) и более простым способом Филлипса (в растворах сульфата меди с различной отно­сительной плотностью) или пикнометрически.

Относительная плотность крови зависит от концентрации ге­моглобина, белков, солей; у самцов она несколько выше. У здоро­вых взрослых животных она имеет следующие значения (г/см³, а в единицах СИ — кг/л): крупный рогатый скот—1,047—1,055; овцы—1,042—1,052; козы —1,044—1,053; лошади —1,045—1,055; яки —1,048—1,062; верблюды — 1,048—1,055; свиньи — 1,042— 1,060; собаки—1,044—1,056; кошки —1,044—1,057; кролики — 1,048-1,060; куры- 1,039-1,057; гуси- 1,045-1,063.

Увеличивается относительная плотность крови при сгуще­нии ее вследствие потения, поноса, рвоты, полиурии, лихорад­ки, непроходимости кишечника, экссудативных и транссудативных процессов, диабете, нефрите, обширных ожогах, умень­шается при анемиях, гемолитической желтухе, кахексии, гидремии.

Скорость свертывания крови.Определяют методом Ли и Уайта: пробирку с 1 мл крови на водяной бане при 37 °С через каждые 30 с наклоняют на 45°, определяя время образования нового сгуст­ка. Применяют также способ Мас и Марго: на часовое стекло, по­крытое парафином, наносят большую каплю вазелинового масла, в которую вводят 20 мкл крови; через каждые 2 мин кровь насасы­вают в пипетку.

Средняя скорость свертываемости крови у крупного рогатого скота 5—6 мин, у овец — 8—10, у лошадей — 8—10, у свиней — 10,—15, у собак —8—10, у кроликов —4, у кур—1,5—2мин. На скорость свертываемости помимо ее физико-химических свойств (сгущение, изменение количества тромбоцитов и т. д.) влияют ок­ружающая температура, степень травмирования тканей при взя­тии крови.

Ускорение свертываемости отмечают при миоглобинурии, лабарном воспалении легких, кровопотерях, замедление — при заболеваниях, протекающих с геморрагическим диатезом, при анемиях, нефритах, холемии; почти не свертывается кровь при сибирской язве, удушье, инфекционной анемии, пироплазмидозах.

 

Ретракция кровяного сгустка.Самопроизвольное отделение сы­воротки крови от ее сгустка при отстаивании называют ретракци­ей. На проявление ее влияют форма сосуда и его положение, тем­пература окружающей среды, температура тела, вид животного, количество факторов свертываемости в крови.

Ретракцию кровяного сгустка осуществляют в пробирке, ко­торую помещают в термостат при 37 °С. Отношение количества сыворотки к объему взятой крови обозначают как индекс ретрак­ции.

Образование кровяного сгустка и частичную ретракцию фиксируют через 1—Зч, полное отделение сгустка — через 12—18ч. Индекс ретракции у лошадей —в пределах 0,3—0,7. У крупного рогатого скота ретракция происходит медленнее, чем у лошади.

Понижение ретракции или полное ее отсутствие (ирретрактильность) возникают при гемобластозах, экссудативном плеври­те, стахиботриотоксикозе. Уменьшение ретракции отмечают при многих лихорадках.

Вязкость крови.Это — свойство крови оказывать сопротивле­ние ее течению, перемещению одного слоя относительно другого под действием внешних сил.

В основе метода определения вязкости крови лежит закон Пуазейля, согласно которому скорость течения жидкости обратно пропорциональна ее вязкости. Исследование вязкости проводят вискозиметрами и сталагмометрами.

Вязкость крови зависит от количества и величины форменных элементов, содержания гемоглобина, углекислоты, концентра­ции солей, белков и соотношения белковых фракций. У крупно­го рогатого скота она составляет 4,2—5,2, у овец — 4,2—5,0, у коз — 5,0—6,0, у лошадей — 3,9—5,0, у верблюдов — 4,3—5,3, у свиней — 4,8—6,2, у собак — 4,8—5,5, у кошек — 4,0—5,0, у кроли­ков — 3,5—4,5, у кур — 4,5—5,5. Повышается при лихорадочных заболеваниях (пневмония, плеврит, перитонит), болезнях, сопро­вождающихся сгущением крови (диспепсия, рвота, водное голода­ние, обильное истечение), сердечных декомпенсациях, гемоблас­тозах, диабете, понижается при анемиях соответственно уменьше­нию количества гемоглобина, эритроцитов и уменьшению их раз­меров.

Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ).Основано на свойстве стабилизированной крови разделяться при стоянии на два слоя: нижний, состоящий из эритроцитов, лейкоцитов, и вер­хний, образованный плазмой. Вначале оседают не связанные меж­ду собой клетки, а затем наступает их агломерация и скорость оседания увеличивается. По мере уплотнения осадка СОЭ замед­ляется.

СОЭ зависит от свойств и состава крови. Наибольшее значение при этом имеют количество белков, соотношение между белковы­ми фракциями, а также содержание эритроцитов и величина их электрического заряда. При увеличении глобулинов и фибриноге­на, обладающих положительным зарядом, отрицательный заряд эритроцитов снижается, способствуя их агломерации, ускорению СОЭ. Более быстрое оседание эритроцитов происходит также при повышении щелочного резерва, содержания холестерина, ионов кальция, уменьшении количества эритроцитов и увеличении их объема.

Замедление СОЭ происходит при увеличении содержания альбуминов, желчных пигментов и кислот, снижении щелочного резерва, а также при увеличении количества эритроцитов, уменьшении их размера и насыщенности гемоглобином (гипохромные эритроциты хуже агломерируют), увеличении вязкости крови.

На СОЭ влияют температура окружающей среды (при низкой температуре она замедляется), антикоагулянты, положение аппа­рата, в котором проводят исследование, некоторые лекарства.

Для определения СОЭ используют макрометоды (способ Неводова), которые применяют чаще у крупных животных, микроме­тоды (способ Панченкова). У животных (кроме лошадей и свиней) СОЭ протекает медленно, пипетки Панченкова ставят иногда с наклоном 50°, при этом происходит ускорение оседания эритро­цитов. Это позволяет более точно измерять СОЭ. Показатели СОЭ у животных колеблются в значительных пределах.

Снижение гемоглобина в крови — олигохромемия возникает при анемиях, вследствие кровотечений, дефицита железа, витамина В₁₂ и фолиевой кислоты, гемолиза эритроцитов, истощения, ряда инфекционных болезней, увеличение — гиперхромемия — при по­носах, потливости, рвоте, образовании транссудатов и экссудатов, миоглобинурии лошадей, альвеолярной эмфиземе легких и при непроходимости кишечника.

В норме содержание метгемоглобина у крупного рогатого скота составляет 0,0—0,1 г/100 мл (0—1 г/л), а сульфгемоглобина — 0,04—0,2 г/100 мл (0,4—2 г/л). Повышение метгемоглобина в кро­ви отмечают при отравлениях нитратами и нитритами, салицилатами, сульфаниламидами, а увеличение сульфгемоглобина — при хронических запорах, лекарственных

и некроза и фагоцитарной функцией; утяются активными ферментообразователями (оксидаза, пероксидаза, каталаза, трипсидамилаза, фосфатаза, липаза, лизоцим); гаствуют в белковом обмене, образовании и переносе антител; тимулируют процессы регенерации тканей.

Гранулоциты образуются (гранулоцитопоэз) в красном костном юзге, проходя в процессе созревания ряд стадий: миелобласт, фомиелоциты, миелоциты, метамиелоциты (юные), палочкоядерные и сегментоядерные, гранулоциты базофильные, нейтрофильные и эозинофильные.

Продолжительность жизни гранулоцитов 9—13 дней, причем на незрелые костномозговые стадии приходится 5—6 дней, а внутрисосудистый период их жизни составляет всего от нескольких часов до 2 дней, после чего гранулоциты переходят в ткани, где осуществляют свои основные функции и погибают в желудочно-кишечном тракте, легких, селезенке, печени.

Моноциты самые активные фагоциты периферической крови; они способны к движению; содержат протеолитические ферменты; участвуют в продуцировании иммунных тел.

Моноциты образуются в красном костном мозге, проходят сле­дующие стадии развития: монобласт, промоноцит и моноцит. В периферической крови содержатся только зрелые моноциты, ко­торые циркулируют около 1,5 сут, а затем проходят в ткани, уве­личиваются в размере, повышают фагоцитарную способность и превращаются в макрофаги. Последние в значительном количе­стве пронизывают соединительную ткань (гистиоцит); образуют скопления в синусах печени (купферовы клетки), легких (альвео­лярные макрофаги), селезенке, лимфатических узлах, коже, кост­ном мозге, нервной ткани (клетки микроглии), где они живут 40— 60 дней. Общее количество макрофагов образует систему фагоци­тирующих мононуклеаров.

Лимфоциты крови состоят из Т- и В- клонов, имеются во всех тканях, но особенно много в слизистой оболочке кишечника. Участвуют в образовании гуморального (В-лимфоциты) и ткане­вого (Т-лимфоциты) иммунитета; продуцируют сывороточные гамма-глобулины; обладают фагоцитарной способностью; содер­жат ряд ферментов (липаза, катепсин, амилаза, лизоцим и др.); фиксируют токсины; участвуют в кишечном пищеварении, захва­тывая и транспортируя липиды; подают сигналы красному кост­ному мозгу о том, какие виды клеток крови и в каком количестве необходимо продуцировать.

Образование лимфоцитов начинается в красном костном мозге из частично детерминированных клеток-предшественниц лимфо-поэза. Одни из них мигрируют в тимус, где образуются Т-лимфоциты, составляющие около 80 % всех лимфоцитов; Т-лимфоциты остаются в крови до 200—300 сут. Из других клеток-предшественниц в костном мозге образуются предшественницы В-лимфоцитов, которые дозревают в лимфоидных органах (лимфатических узлах, селезенке, пейеровых бляшках, солитарных фолликулах, миндалинах); В-лимфоциты составляют около 20 % всей популя­ции лимфоцитов и живут около 2 нед.

В отличие от нейтрофилов, которые после выхода в ткани, ве­роятно, обратно в кровь не возвращаются, лимфоциты способны к рециркуляции.

Подсчет лейкоцитов проводят в счетных камерах Горяева (пос­ле разведения крови в меланжерах или пробирках) и кондуктометрическими счетчиками.

Увеличение количества лейкоцитов в крови обозначают как лейкоцитоз, уменьшение — лейкоцитопения (лейкопения). Измене­ние количества лейкоцитов отражает усиление или ослабление функционального состояния кроветворных органов.

Различают относительный (перераспределительный) и абсо­лютный (реактивный и органический) лейкоцитозы. При относи­тельном лейкоцитозе в кровь поступают лейкоциты из кровяных депо. Реактивный лейкоцитоз возникает как реакция на инфек­цию, интоксикацию, аллергию. В основе органического лейкоцито­за лежит гемобластозное нарушение лейкопоэза.

Физиологический лейкоцитоз может быть при беременности (нейтрофилия) незадолго до родов и сразу после них; у новорож­денных в основном за счет нейтрофилов в течение 2 нед.происхо­дит выравнивание лейкограммы; после приема корма (пищевари­тельный лейкоцитоз достигает максимума через 2—3 ч; у полигастричных животных он не выражен); после тяжелой физической нагрузки (миогенный лейкоцитоз).

Медикаментозный лейкоцитоз возникает после парентерального введения белков, вакцин, сывороток, адреналина, кортикостероидов и кортикотропина, жаропонижающих, эфирных масел.

Патологические лейкоцитозы развиваются при инфекционных, лихорадочно-воспалительных, кровепаразитарных заболеваниях, гемобластозах, уремии, обширных ожогах, после кровопотерь.

Лейкопения встречается при отравлениях.

Цветовой показатель и среднее содержание гемоглобина в эритро­ците.Определение концентрации гемоглобина и числа эритроци­тов в крови не всегда позволяет распознать причину анемии. При одном и том же числе эритроцитов может быть различное содер­жание гемоглобина в связи с различной насыщенностью их гемог­лобином.

Для определения соотношения между количеством эритроци­тов и насыщенностью их гемоглобином используют цветовой по­казатель и среднее содержание гемоглобина в одном эритроците.

Содержание гемоглобина в одном эритроците и величина цве­тового показателя зависят от объема эритроцитов и насыщенности их гемоглобином. В зависимости от их соотношения выделяютнормо-, гипер- и гипохромию эритроцитов. Если цветовой пока­затель и содержание в одном эритроците нормальны, это нормохромия. Ее устанавливают и при анемиях (постгеморрагические и гемолитические, гипо- и апластические). Увеличение среднего со­держания гемоглобина в одном эритроците в сочетании с повыше­нием цветового показателя (увеличение объема эритроцитов -макроцитоз, а не повышение насыщения их гемоглобином) обозначают как гиперхромию. Такое состояние бывает при хрони­ческих гемолитических, миелотоксических анемиях, при цианко-баламиновой недостаточности. Снижение цветового показателя (гипохромия) возможно при уменьшении объема эритроцитов (микроцитоз) и снижении насыщенности гемоглобином нор­мальных эритроцитов. Его отмечают при железодефицитных ане­миях.

Уменьшение числа эритроцитом — эритроцитопению (эритропению, олигоцитемию) обо тачают как анемию, вызванную недо­статочным, неполноценным кормлением (недостаток белков, ви­тамина В₁₂, кобальта, железа, меди), длительной интоксикацией, отравлением гемолитическими ядами, кровопотерей, лучевой бо­лезнью, гемобластозом.

Увеличение количества эритроцитов — эритроцитоз (полицитемия, полиглобулия) отмечают при жсикозе воды вследствие по­тения, диареи, образования транссудатов и экссудатов, при не­проходимости кишечника, хронической альвеолярной эмфиземе, декомпенсации сердца, водном голодании.

Подсчет количества лейкоцитов. Лейкоциты крови неоднород­ны как морфологически (гранулоциты — базофилы, эозинофилы, нейтрофилы; аграпулоциты лимфоциты, моноциты), так и по функциональному значению: они выполняют защитную, трофи­ческую, транспортную функции.

Базофилы способны в слабой степени к фагоцитозу; со­держат окислительные ферменты; участвуют в предотвращении свертывания крови, гак как содержат гепарин; играют роль во вза­имодействии антиген-антитело; при аллергических реакциях происходит дегрануляция их с высвобождением гистамина; уча­ствуют в жировом обмене.

Эозинофилы обладают способностью к активному фаго­цитозу; основная их функция связана с участием в аллергических реакциях, они нейтрализуют избыток гистамина при аллергии. Эозинофилы перенося! продукты распада белков, обладающих антигенными свойствами, предупреждая местное скопление анти­генов. При аллергиях связывают, обезвреживают и транспортиру­ют антигены и гнетамин к обезвреживающим органам. Участвуют в тканевой регенерации и окислительных процессах.

Нейтрофилы обладают способностью к проникновению ткани к очагам воспаления вирусных болезнях, сальмонеллезе, стахиботриотоксикозе, истощении, лучевой болезни.

В зависимости от стадии болезни, состояния животного и других причин могут развиться поочередно и лейкоцитоз, и лейко­пения.

Подсчет количества тромбоцитов. В тромбоцитах (кровяных пластинках) содержится больше десятка факторов свертывания крови. Они участвуют в защитных реакциях организма, прилипая к бактериям и паразитам, захватывая токсины и транспортируя их в селезенку.

Тромбоциты образуются в красном костном мозге, проходя стадии мегакариобласта, промегакариоцита, мегакариоцита, при отшкуривании цитоплазмы которого остаются кровяные пластин­ки. В крови находятся только тромбоциты, при патологии встре­чаются мегакариоциты. Тромбоциты циркулируют в крови 5— 8 сут, затем отмирают в селезенке.

Подсчитывают тромбоциты в счетной камере Горяева или по окрашенным мазкам (метод Фонио).

Чаще у животных возникает тромбоцитопения, что выявляют при большинстве инфекционных болезней, геморрагическом диа­тезе, анемии, А-гиповитаминозе, лучевой болезни, энтеритах, гемобластозах. Реже регистрируют увеличение содержания тромбо­цитов (тромбоцитоз), возникающее при сгущении крови, воспа­лении легких, плеврите, ожогах, асфиксии, травмах, в стадии реконвалесценции при инфекционных болезнях, после хирургических операций, при миелолейкозе.

Подсчет количества клеток крови у птиц.У птиц эритроциты и тромбоциты имеют овальную форму и содержат ядра. Кроме того, эритроциты не разрушаются в жидкости Тюрка. В связи с этим у птиц вначале подсчитывают в камере Горяева все виды клеток, а затем по окрашенным мазкам определяют (при подсчете 1000 кле­ток) процент эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов.

Более простой метод — прямой подсчет в одной камере Горя­ева каждого вида клеток после разведения (в меланжере или пробирке) специальными жидкостями-разбавителями, содержа­щими краски и соли (например, 0,1%-ный раствор азура II на 0,85%-ном растворе натрия хлорида или 0,01%-ный раствор крис­таллического фиолетового на 3,8%-ном растворе цитрата натрия с формалином).

Морфология клеток крови.Для выявления патологических из­менений в клетках крови, дифференциации лейкоцитов при выве­дении лейкограммы, определения молодых и атипичных клеток крови используют окрашенные мазки.

При дифференциации клеток обращают внимание на следую­щие морфологические признаки.

Величина клеток крови различна: от 1—4 мкм в диа­метре у тромбоцитов до 50—70 мкм у мегакариоцитов. Молодые клетки крупнее зрелых форм, но есть исключения из этого прави­ла — промиелоциты больше миелобластов, мегакариоциты круп­нее мегакариобластов.

Форма клеток обычно округлая, реже неправильная (ретикулярные клетки, мегакариоциты, иногда моноциты). Важ­ное диагностическое значение имеет изменение формы эритроци­тов (звездчатые, овальные, деформированные).

Соотношение ядро — цитоплазма тем больше, чем моложе клетка. Особенно показательно это увеличение у бластных и злокачественных клеток.

Форма ядра чаще круглая и вогнутая. Только в клетках гранулоцитарного, мегакариоцитарного и моноцитарного рядов ядро вытянутое, сегментированное или полиморфное.

Хроматиновая структура ядра имеет большое значение для дифференциации клеток. При окраске оксихроматин приобретает светло-фиолетово-коричневый цвет, а базихроматин — темно-фиолетово-коричневый. Чем моложе клетка, тем больше в ядре оксихроматина; ядро светлее, чем в зрелых клетках. По мере созревания в ядре увеличивается количество базихрома-тина, и оно окрашивается в более темный цвет.

У молодых (бластных) клеток базихроматин образует тонкую сетку на гомогенном светлом оксихроматиновом фоне. По мере созревания клетки в узлах сетки базихроматин образует утолще­ния. В дальнейшем сетка исчезает, а базихроматин сливается в конгломераты, которые образуют темно-фиолетовые зоны ядра, или все ядро превращается в гомогенное образование.

Ядрышки (нуклеолы) содержатся в ядрах молодых, за­родышевых клеток крови. Они круглой или овальной формы и ок­рашиваются в светло-синий или светло-фиолетовый цвет. В ядре зрелых клеток нуклеолы отсутствуют.

Цитоплазма молодых клеток базофильна. При созрева­нии она меняет цвет соответственно виду клетки. Цитоплазма не имеет структуры, однако у лимфоцитов и плазмоцитов вокруг ядра — зона просветления, у эритробластов она пористая. В ци­топлазме моноцитов, ретикулоцитов и плазмоцитов могут присут­ствовать вакуоли. У других клеток вакуолизация цитоплазмы и ядра встречается только в патологии. В некоторых моноцитах, ре­тикулярных клетках, мегакариоцитах в цитоплазме находят фаго­цитированные элементы (пигментные зерна, эритроциты, лейко­циты, тромбоциты и их сегменты).

Зернистость в цитоплазме гранулоцитов может быть ба-зофильной, эозинофильной или нейтрофильной. В промиелоци-тах, моноцитах, иногда в лимфоцитах возникает неспецифическая азурофильная зернистость розово-фиолетового цвета.

Определение лейкограммы.Определение количества лейкоци­тов имеет большое диагностическое значение, однако не дает представления о соотношении между отдельными видами лейко­цитов и их качественных изменениях. Эти данные получают при составлении лейкограммы с учетом морфологических изменений лейкоцитов в окрашенных мазках.

Лейкограмма (лейкоцитарная формула) — это процентное со­отношение между отдельными видами лейкоцитов крови, запи­санное в определенном порядке. Определяют лейкограмму под микроскопом по окрашенным мазкам под иммерсией. Применя­ют дифференциальный подсчет 100 или 200 лейкоцитов четырех­польным методом Шиллинга или трехпольным методом Филип-пченко. Для регистрации каждого вида лейкоцитов используют одиннадцатиклавишные счетчики.

Наряду с определением процентного соотношения между от­дельными видами лейкоцитов важное значение имеет подсчет их количества, т. е. количество каждого вида в 1 мкл крови. Выраже­ние лейкограммы в процентах и абсолютных величинах позволяет установить природу лейкоцитоза.

Особое значение имеет определение возраста нейтрофилов. С этой целью определяют индекс сдвига. 

Для каждого вида животных типичен свой индекс сдвига. Так, у крупного рогатого скота он составляет около 1/3, а у лошадей — 1/12. При увеличении количества молодых форм нейтрофилов (палочкоядерных, юных, миелоцитов) возрастает числитель, это означа­ет сдвиг ядра влево. Если увеличивается процент старых форм нейтрофилов (сегментоядерных), то повышается знаменатель, это соответствует сдвигу ядра вправо.

Изменения лейкограммы.Основная масса клеток крови пред­ставлена зрелыми формами, которые непрерывно обновляются: на смену отмирающим клеткам из органов гемопоэза поступают новые. При патологии такое динамическое равновесие в смене клеток крови нарушается. При незначительном воздействии на ге-мопоэз и функциональной полноценности органов гемопоэза из­менения морфологического состава крови не выражены. При сильных воздействиях появляются молодые формы. Особенно ясно такие изменения выражены среди нейтрофилов, когда появ­ляются палочкоядерные (в большем, чем в норме количестве), юные и даже миелоциты.

При лейкоцитозах возрастает число не всех видов лейкоцитов, а каких-либо отдельных: нейтрофилов, лимфоцитов, эозинофилов, моноцитов или базофилов. Увеличение в лейког­рамме процента одного вида лейкоцитов отмечают и при нор­мальном числе лейкоцитов, и даже при лейкопении.

Характер патологического процесса может накладывать суще­ственный отпечаток на лейкограмму.

Увеличение лейкоцитов какого-либо одного вида обозначают как видовой лейкоцитоз (нейтрофилия, лимфоцитоз, эозинофилия, моноцитоз, базофилия), уменьшение расценивают как видо­вые лейкопении (нейтропения, лимфоцитопения, эозинопения, моноцитопения). Такое увеличение или уменьшение может быть абсолютным и относительным. Если наряду с ростом лейкоцитов одного вида в лейкограмме выявляют и абсолютное увеличение их количества в 1 мкл, такое состояние обозначают как абсолютный видовой лейкоцитоз. При уменьшении лейкоцитов того или иного вида в лейкограмме и абсолютного их количества в 1 мкл говорят об абсолютной видовой лейкопении.

Относительный видовой лейкоцитоз констатируют, когда увели­чение в лейкограмме процента какого-либо вида лейкоцитов со­провождается снижением общего количества этих клеток, в ре­зультате чего абсолютное количество лейкоцитов этого вида в1 мкл крови будет нормальным. Относительная видовая лейкопения бывает, когда количество лейкоцитов какого-либо вида в лейког-рамме понижено, но в связи с повышением общего числа лейко­цитов абсолютное содержание этого вида лейкоцитов в 1 мкл нор­мальное.

Среди нейтрофилов при патологических состояниях помимо зрелых форм увеличивается число палочкоядерных, появляются юные и даже миелоциты. Такое состояние принято называть сдви­гом ядра влево. Если увеличивается количество сегментоядерных нейтрофилов с гиперсегментацией ядра и уменьшается содержа­ние палочкоядерных, возникает сдвиг ядра вправо.

В лейкограмме может быть выявлено наличие патологических изменений в ядре и цитоплазме лейкоцитов.

Типичные изменения в составе крови наблюдают при септи­ческих процессах, в течение которых различают три фазы: 1 -я — фаза нейтрофильной борьбы; 2-я — фаза моноцитарной защиты и преодоления; 3-я — лимфоцитарная фаза выздоровления.

В первую фазу в лейкограмме увеличиваются количество лейко­цитов и процентное содержание нейтрофилов за счет молодых форм (сдвиг ядра влево); процентное содержание лимфоцитов и моноцитов уменьшено, а базофилы и эозинофилы могут отсут­ствовать.

Во вторую фазу происходит перелом в течении болезни, умень­шаются лейкоцитоз (но он выше нормы) и число нейтрофилов, процентное содержание моноцитов возрастает, повышается коли­чество лимфоцитов, появляются эозинофилы.

В третью фазу (реконвалесценции) продолжается увеличение числа лимфоцитов, эозинофилов и моноцитов, содержание нейт­рофилов в норме или снижено, сдвига ядра влево нет; количество лейкоцитов восстанавливается или незначительно повышено.

Анализ лейкограммы служит методом исследования, результа­ты которого нужно рассматривать с учетом других показателей крови, данных клинического исследования. Лейкограмма, как и другие показатели крови, изменяется в процессе заболеваний.

Нейтрофилия (нейтрофилез) характерна для гнойно-воспалительных процессов, причем по характеру сдвига ядра и выраженности нейтрофильной реакции можно судить о тя­жести и стадии заболевания. По степени регенерации нейтрофильный лейкоцитоз разделяют на четыре вида.

Нейтрофилия с гипорегенеративным сдвигом проявляется повы­шением количества палочкоядерных нейтрофилов (до 10—13 %) при незначительном увеличении количества лейкоцитов (при доб­рокачественном течении гнойно-воспалительных процессов и не­тяжелых инфекционных болезнях).

Нейтрофилия с регенеративным сдвигом характеризуется увели­чением числа палочкоядерных клеток с появлением юных нейтро­филов. Лейкоцитоз умеренно выражен (при острых инфекционных заболеваниях, эндокардите, септических заболеваниях). У ло­шадей это бывает при тяжелой работе, когда картина крови сходна с изменениями при инфекционных заболеваниях.

Нейтрофилия с резким гиперрегенеративным сдвигом характери­зуется появлением в крови нейтрофилов и даже миелоцитов, по­вышением количества палочкоядерных нейтрофилов при значи­тельном лейкоцитозе (при септических инфекциях и гнойно-вос­палительных процессах). Высокий нейтрофилез при уменьшении числа лейкоцитов свидетельствует о тяжелом течении болезни при низкой резистентности организма.

Нейтрофилия с дегенеративным (гипопластическим) сдвигом в нейтрофилах констатируется, когда обнаруживают признаки деге­нерации нейтрофилов, а в лейкограмме отмечают увеличение па­лочкоядерных и уменьшение сегментоядерных нейтрофилов (при длительных тяжелых септических состояниях, протекающих с токсическим воздействием на органы гемопоэза).

Нейтрофилия со сдвигом ядра вправо характеризуется увеличе­нием количества гиперсегментированных нейтрофилов при нор­мальном или пониженном числе палочкоядерных (после кровопотерь, у старых и истощенных животных).

При оценке нейтрофилий необходимо учитывать изменение количества и других видов лейкоцитов. Так, нейтропения и ослаб­ление сдвига ядра влево в сочетании с появлением эозинофилов и увеличением числа лимфоцитов при умеренном лейкоцитозе ука­зывают на благоприятное течение болезни, а усиление сдвига ней­трофилов влево, исчезновение эозинофилов и появление лимфо-цитопении — на усиление болезни.

Нейтропения указывает на функциональное или орга­ническое угнетение гранулоцитопоэза в костном мозге (при выз­доровлении от острых инфекций, при вирусных болезнях, али­ментарной дистрофии, лучевой болезни).

Лимфоцитоз бывает чаще относительным, реже абсолют­ным. Лимфоцитоз при нормальном или повышенном количестве лейкоцитов с нейтропенией сопровождает туберкулез, бруцеллез, лимфолейкоз, ожоги кожи, сахарный диабет, тиреотоксикоз, реконвалесценцию от острых инфекционных заболеваний.

Существует взаимозависимость между числом лимфоцитов и эритроцитов в крови. Лимфоцитоз в сочетании с нормальным со­держанием эритроцитов рассматривают как благоприятный симп­том. Если лимфоцитоз протекает при снижении количества эрит­роцитов, — это неблагоприятный симптом. Если лимфоцитоз со­провождается снижением числа эритроцитов, — это также небла­гоприятный симптом (усиление интоксикации и снижение гемопоэза).

Лимфоцитопения бывает относительной при нейтрофильных лейкоцитозах, сепсисе, кровопятнистой болезни, в на­чальной стадии чумы свиней. Усиливающуюся лимфоцитопению наряду с лейкопенией считают прогностически неблагоприятным признаком. Увеличение числа лимфоцитов, эозинофилов и моно­цитов — симптом благоприятный.

Эозинофилия возникает при аллергии (сывороточная болезнь, крапивница, бронхиальная астма), глистных инвазиях, кожных заболеваниях. Некоторая эозинофилия отмечается в пе­риод выздоровления при инфекционных заболеваниях (на фоне снижения нейтрофилии). Она бывает при альвеолярной эмфизе­ме, хроническом бронхите, миелолейкозе, роже свиней.

Эозинопения возникает при острых септических заболе­ваниях и интоксикациях, вирусных болезнях, уремии. При инфек­ционных заболеваниях возникновение эозинопении в сочетании с нейтрофилией указывает на хорошую реакцию органов гемопоэза. Если отмечают эозинопению с лейкопенией (нейтропенией) или слабой нейтрофилией, это следует рассматривать как неблагопри­ятный признак. Уменьшение содержания эозинофилов и их ис­чезновение (анэозинофилия) служат неблагоприятным призна­ком, а появление этих клеток — симптомом, свидетельствующим о наступлении благоприятного перелома в течении болезни.

Моноцитоз чаще возникает при нормальном или умень­шенном количестве лейкоцитов и реже — при наличии лейкоци­тоза. Может возникать после и при субклинических заболеваниях, протозойных болезнях, злокачественных новообразованиях, рети-кулезах. При наличии сдвига нейтрофильного ядра влево он мо­жет свидетельствовать о скрыто протекающей хронической ин­фекции. При моноцитозе, сочетающемся с нейтрофилией и лей­коцитозом, болезнь развивается в благоприятном направлении.

Моноцитопения развивается в начале острых инфек­ционных заболеваний. Отсутствие моноцитов при наличии выра­женной нейтрофилии считают неблагоприятным признаком.

Базофилия может быть при миелолейкозе, гельминтозах (одновременно с эозинофилией), миоглобинурии, голодании, чуме.

Патологические изменения лейкоцитов.У нейтрофилов возникает анизоцитоз, т. е. появляются клетки различной величи­ны, с наличием токсигенной зернистости, вакуолей и пятен свет­ло-синего цвета (тельца Князькова — Деле) в цитоплазме, а в ядре — вакуолизация, сегментация (вместо 2—5 сегментов появля­ется больше), кариорексис (лопанье ядра), пикноз (сморщивания ядра), разрыв связи между сегментами.

У лимфоцитов цитоплазма приобретает сероватый отте­нок и содержит вакуоли, ядро окрашивается неравномерно, раз­рыхлено и имеет неровные края.

У моноцитов вакуолизированнаяцитоплазмадиффузно-серого цвета с желтоватым оттенком; ядро расчлененное, поли­морфное, разрыхленное, размер клетки больше, чем обычно.

У эозинофилов в цитоплазме содержатся круглые и овальные гранулы, которые окрашиваются в красно-фиолетовый цвет; ядро гиперсегментировано, неравномерно окрашено.

Патологические изменения эритроцитов.Возникают они при анемиях, при этом изменяются величина, форма, окраска эритро­цитов и различных включений в них.

Изменение величины (анизоцитоз) характеризуется появлением эритроцитов, размер которых меньше (микроциты) или больше нормальных (макроциты), а также очень крупных кле­ток (мегалоциты).

Изменение формы (пойкилоцитоз) — эритроциты при­обретают звездчатую, вытянутую, грушевидную или неопределен­ную форму.

Изменение окраски (анизохромия) возникает, когда наряду с нормальными эритроцитами (нормохромными, ортохром-ными) появляются или сильно окрашенные (гиперхромные), или слабоокрашенные (гипохромные, олигохромные), а также незрелые эритроциты с признаками базофилии, окрашенные в серовато-си­реневый, синевато-розовый, светло-, темно-синий или слабо-фи­олетовый цвета (полихроматофилъные).

Включения в эритроцитах проявляются в виде 1 —2 ярко-красных небольших круглых образований — телец Жолли (остатки ядра); красно-фиолетового цвета образований, имеющих форму восьмерки, овала, латинской буквы 5 — колец Ке-бота (остатки оболочки ядра); темно-синего цвета зернистости — базофильной пунктации. При суправитальной окраске мазков кро­ви бриллиантовым крезиловым синим могут быть выявлены рети-кулоциты — недозревшие эритроциты с зернистосетчатой субстан­цией голубого или синего цвета.

Патологические изменения тромбоцитов.Характеризуются появ­лением гигантских кровяных пластинок, наличием вакуолизации, исчезновением в цитоплазме грануляции (грануломера).

Гемобластозы (лейкозы).К числу заболеваний, при диагностике которых исследование морфологического состава крови имеет ре­шающее значение, относят гемобластозы — злокачественные за­болевания системы крови, которым свойственно злокачественное разрастание кроветворных органов с нарушением созревания кле­ток крови.

У крупного рогатого скота возникают следующие гемобласто­зы: лейкозы — лимфолейкоз, миелолейкоз, острый лейкоз (слабо-дифференцированный или недифференцированный лейкоз); ретикулезы — лимфосаркома, ретикулосаркома, лимфогранулема­тоз, системный ретикулез.

Диагностика гемобластозов основана на результатах гематоло­гических и клинических исследований. Учитывают количество эритроцитов, лейкоцитов, данные лейкограммы, обращая особое внимание на выявление молодых, малодифференцированных, а также атипичных и ретикулярных клеток.

При гемобластозах число лейкоцитов повышается до сублейке-мического (10—40 тыс/мкл), реже до лейкемического уровня (свы­ше 40тыс/мкл), редко они протекают с алейкемическим (4,5— 10 тыс/мкл) или лейкопеническим уровнем (меньше 4,5 тыс/мкл).

У крупного рогатого скота установлена вирусная этиология ге­мобластозов, в связи с чем разработаны серологические методы диагностики (реакция иммунодиффузии — РИД, реакция имму-нофлуоресценции — РИФ и др.).

Лимфолейкоз (лимфаденоз) протекает по сублейкемическому варианту с лимфоцитозом (75—99 %), чаще по зре-локлеточному типу. Среди зрелых лимфоцитов могут появиться ридеровские формы и двухъядерные лимфоциты. При высоких лейкоцитозах находят незрелые разновидности лимфоцитов — пролимфоциты и лимфобласты, лимфоциты с митозом ядра; воз­растает количество разрушенных лейкоцитов (тел Боткина — Гумпрехта); в цитоплазме лимфоцитов почти не встречаются азуро-фильные зерна.

Миелолейкоз (миелоз) проявляется сублейкемическим и лейкемическим уровнем лейкоцитов; в лейкограмме преоб­ладают молодые формы нейтрофилов, эозинофилов и базофилов, имеющие положительную оксидазную реакцию (у лимфоидных клеток она отрицательная).

Острый лейкоз (гемоцитобластоз) характери­зуется лейкемическим течением, наличием в лейкограмме боль­шого количества пролимфоцитов, лимфобластов и других бластных, а также ретикулярных клеток.

Ретикулезы протекают в виде лимфосаркоматоза, рети-кулосаркоматоза и других форм. Прижизненно дифференциро­вать отдельные формы ретикулезов на основании клинических и гематологических исследований трудно. Требуются исследования пунктатов и костного мозга, селезенки, лимфатических узлов. При ретикулезах число лейкоцитов находится на сублейкемическом или алейкемическом уровне. В лейкограмме отмечают нали­чие ретикулярных, лимфоретикулярных, атипичных клеток, про­цент эозинофилов в норме или повышен.

 Изменения кислотно-щелочного равновесия протекают при недостатке щелочных эквивалентов с ацидозом, а при недостатке кислотных эквивалентов с алкалозом. Ацидоз и алкалоз могут быть компенсированными (без сдвига рН) и некомпенсированны­ми (со сдвигом рН), а также газовыми, дыхательными (при умень­шении или увеличении выделения легкими СО₂) или негазовыми, метаболическими (избыточное образование кислых эквивалентов или нарушение выведения оснований из организма).

Респираторный ацидоз возникает при эмфиземе легких, бронхиальной астме, бронхите вследствие гиповентиляции легких (задержка СО₂).

Метаболический ацидоз развивается при увеличении в крови органических кислот вследствие нарушения межуточного обмена, недостаточном выделении и нейтрализации этих метаболитов. Он возникает при скармливании кислых кормов, обильной даче кон­центратов, скудном кормлении, плохой вентиляции помещений, недостатке инсоляции, отсутствии или недостатке моциона, рахи­те и остеодистрофии, атонии преджелудков, бронхопневмониях, лихорадочно-воспалительных процессах, сахарном диабете, кетозах, послеродовом парезе, диспепсиях, сердечно-сосудистой и ды­хательной недостаточностях, нефрите.

Респираторный алкалоз возникает при гипервен­тиляции легких (повышенное выведение СО₂) вследствие перегре­вания организма, энцефаломиелита.

Метаболический алкалоз развивается при потере организмом кислых эквивалентов (увеличение содержания ще­лочных эквивалентов) или при избыточном введении щелочных продуктов, при рвоте, фибринозной пневмонии, пироплазмозе, перекорме сахаросодержащими кормами.

Каротин и витамин А.Каротиноиды являются провитаминами ретинола — витамина А. Они содержатся в растительных кормах, молоке, молозиве, яичном желтке, печени, рыбьем жире. Наи­большее значение имеет ᵦ-каротин. В тонком кишечнике и пече­ни ᵦ-каротин превращается в витамин А (ретинол). Основное депо каротина и витамина А — печень.

Витамин А участвует в реакциях окисления в клетках эпителия, входит в состав зрительного пурпура (родопсина), способствует биосинтезу холестерина, ускоряет обмен фосфорных соединений, участвует в обмене веществ, повышает реактивность и резистент-ность, участвует в процессах иммуногенеза, повышении фагоци­тарной активности лейкоцитов и выработке антител, стимулирует рост и развитие животных.

Количество каротина в сыворотке крови определяют по мето­дике Коромыслова и Кудрявцевой осаждением белков (и связан­ного с ними каротина) этанолом с последующей экстракцией петролейным эфиром (или бензином) и колориметрированием. Со­держание витамина А в сыворотке крови определяют также мето­дом Бессея в модификации Анисовой на спектрофотометре с использованием ксилололигроиновой или ксилолооктановой сме­си.  

Уменьшение количества каротина в сыворотке — гипокароти-немия, а витамина А — гиповитаминоз А.

При недостатке каротина и витамина А у молодняка отмечают задержку роста, поражение кожи и слизистых глаз, легких, брон­хов и трахеи, пищеварительного тракта (диспепсия), половых желез, почек, мочевыводящих путей. Возникают ксерофтальмия, кератоконъюнктивит и кератомаляция. Теряется способность видеть предметы в сумерках («куриная слепота»). Ослабляется устойчивость к инфекциям. Возникают бесплодие, нарушение половых циклов, задержание последа, субинволюция матки, аборты, снижение продуктивности, а у быков — нарушение спермиогенеза.

Витамин С (аскорбиновая кислота).Витамин С участвует в кле­точном дыхании, росте и делении клеток, кальциевом, аминокис­лотном, углеводном и жировом обменах, регулирует кроветворе­ние и сосудистую проницаемость, активирует ферменты и гормо­ны, участвует в окислительно-восстановительных процессах, сти­мулирует антитоксическую и белковообразующую функции печени, способствует повышению реактивности и резистентности, влияя на выработку антител, повышение бактерицидности крови, фагоцитарной активности лейкоцитов, стимулирует рост и развитие молодняка.

Количество аскорбиновой кислоты в сыворотке крови определяют методом титрования с индофеноловым реак­тивом (2,6-дихлорфенолиндофенола натриевая соль).

При гиповитаминозе С развивается цинга (скорбут), возникают кровоизлияния в коже, на слизистых оболочках и анемии. Недо­статочность витамина С возникает чаще у молодняка, свиней, плотоядных. Характеризуется снижением иммунобиологической реактивности, предрасполагает к инфекционным болезням; появ­ляется кровоточивость десен, расшатывание и выпадение зубов; снижается количество гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов в крови.

Общий кальций. Кальций входит в состав костей; участвует в свертывании крови, понижает проницаемость клеточных мемб­ран; активирует пропердиновую систему; повышает фагоцитар­ную активность лейкоцитов; поддерживает возбудимость нервов и мышечной ткани; уменьшает способность тканевых коллоидов связывать воду; повышает тонус миокарда; понижает проницае­мость кровеносных сосудов; повышает тонус симпатического от­дела вегетативной нервной системы; активирует ферменты.

Кальций всасывается в передней части тонкого кишечника, а выделяется в основном толстым кишечником, а также почками и печенью; у лактирующих животных кальций выделяется в основ­ном с молоком.

В сыворотке крови общий кальций находится в виде ультра­фильтрующейся (диффундируемой) и коллоидной (недиффундируемой) фракций. Среди соединений кальция различают белковосвязанный (кальцийпротеинаты, комплексоны), ионообменный и кислоторастворимый кальций.

Регуляция обмена кальция в организме осуществляется паращитовидными, щитовидными железами и витамином D.

Количество общего кальция в сыворотке крови определяют комплексонометрическими методами с трилоном Б (комплексоном III) и индикатором флюорексоном или мурексидом.

Снижение общего кальция в сыворотке — гипокалъциемия — возникает при рахите, остеомаляции, голодании, уремии, нефрозе и нефрите, послеродовом парезе, бронхопневмонии, экссудатив-ном плеврите, анемиях, гемобластозах, диабете, тяжелых заболе­ваниях, диспепсиях, гипопаратиреозе, панкреатите, гематурии крупного рогатого скота, отечной болезни поросят, туберкулезе и паратуберкулезе, фасциолезе.

Гиперкалъциемия бывает при остеодистрофии, гипервитаминозе D, деформирующем артрозе быков, остеомах, гиперпаратиреозе, сердечной недостаточности, перитоните, желтухе; может иметь алиментарное происхождение.

Неорганический фосфор. До 85 % всего фосфора организма со­держится в костной ткани. Присутствует в мышечной ткани (8— 9 %), в нервной ткани (до 0,7 %) и в крови (до 0,2 %). Входит в со­став фосфатного буфера крови, участвующего в регуляции кислот­но-щелочного равновесия; активирует ферментативные процессы, участвует в углеводном, жировом и белковых обменах, а также в процессах фосфорилирования, входит в состав аденозинмонофос-фата, аденозиндифосфата, аденозинтрифосфата и др.

В состав общего фосфора крови входят две фракции: неоргани­ческий фосфор (соли фосфорной кислоты) и органический (фосфатиды, липоидный фосфор), фосфор нуклеопротеидов (фосфопротеиды), кислоторастворимый органический фосфор (эфиросвязанные соединения — аденозиндифосфорная и аденозинтрифос-форная кислоты, гексозофосфаты, триозофосфаты). Наибольшее клиническое значение имеет определение неорганического фос­фора в сыворотке крови.

В клетках крови фосфор содержится только в составе органи­ческих соединений, а в сыворотке в основном присутствует неор­ганический фосфор.

Всасывание фосфора происходит в тонком кишечнике, чему способствует его щелочная среда. При избытке кальция и магния в кишечном содержимом и недостатке витамина D всасывание фосфора ухудшается. Экскреция фосфора из организма происхо­дит в основном с мочой, в меньшей мере с калом; в период лакта­ции фосфор в основном выделяется с молоком.

Основные регуляторы обмена фосфора в организме — паращитовидные железы, витамин D, щитовидная железа и почки.

Определение количества неорганического фосфора в сыворот­ке крови проводят по Пулсу в модификации Коромыслова и Кудрявцевой с ванадат-молибдатным реактивом; по Фиске и Суббароу с эйконогеном и по Аммону и Гинсбергу в мо­дификации Ивановского с аскорбиновой кислотой. При длитель­ном состоянии сыворотки крови происходит диализ органическо­го фосфата, увеличивается концентрация неорганического фосфо­ра, поэтому необходимо проводить анализ свежей сыворотки илиполучить безбелковый фильтрат, осадив белки трихлоруксусной кислотой.

Снижение содержания фосфора в сыворотке крови — гипофосфатемия — возможно при рахите, остеомаляции, гиперпаратирео­зе, хронической гематурии крупного рогатого скота. Повыше­ние — гиперфосфатемия — бывает при мышечном перенапряже­нии, гипопаратиреозе, гипервитаминозе D, заживлении перело­мов костей, нефрите, пиелонефрите, нефросклерозе, нефрозе, желтой атрофии печени, гемобластозах.

Магний.Магний входит в состав костей (около 1,5 % всех ми­неральных веществ костей); участвует в мышечном сокращении; активирует включение фосфора в органические соединения; сти­мулирует образование аденозинтрифосфорной кислоты; поддер­живает резистентность организма, участвуя в образовании пропердиновой системы и стимулируя выработку антител; является активатором ферментов; тормозяще влияет на центральную не­рвную систему; участвует в синтезе ацетилхолина.

В крови магний содержится в виде ионов (ионизированный, диффундирующий магний, около 70—85 % всего магния) и в виде магний-протеинатов (комплексонов).

Магний всасывается преимущественно в тонком кишечнике, при повышении его количества в организме усиливается выведе­ние магния с мочой. Избыток магния откладывается в костной ткани, а затем и в других тканях. Экскретируется этот элемент че­рез толстый кишечник (50—80 %) и почки. Обмен его регулирует­ся гормонами щитовидной и паращитовидной желез и коры над­почечников.

Содержание магния в сыворотке крови (см. табл. 18) определя­ют колориметрически по цветной реакции с титановым желтым или магоном.

Гипомагниемия бывает при пастбищной титании у жвачных (вследствие поступления в организм с молодой травой избытка калия и азотистых соединений), алиментарной остеодистро­фии, послеродовом парезе, диарее, белково-минеральном голо­дании, циррозе печени, панкреатите. Гипермагниемия возникает при почечной недостаточности, гипертиреоидизме, болезнях печени.

Железо.Входит в состав дыхательных пигментов (гемоглобина и миоглобина), содержится в клеточных дыхательных ферментах (каталазе, пероксидазе, цитохромах).

Железо всасывается в тонком кишечнике в виде хлористо-водородной соли двухвалентного закисного железа, а также в желудке и в толстом кишечнике. В слизистой оболочке кишечника ионы железа соединяются с апоферритоном, окисляются и образуют ферритин, в котором железо содержится в трехвалентной форме, неспособной проходить в плазму крови. При участии ксантинок-сидазы образуются ионы двухвалентного железа, которые поступают в кровь, соединяются с белком трансферином и транспорти­руются в костный мозг, печень и другие органы. Усвояемость же­леза зависит от наличия в организме меди и витамина В₁₂ (цианкобаламина).

Железо гемоглобина составляет более половины всего наличия его в организме, миоглобиновое железо — 10—15 %; резервное же­лезо (в виде железобелковых комплексов ферритина и гемосидерина) в печени, селезенке, костном мозге — 20 %; железо оксидаз, цитохромных ферментов — 10—15%; железо плазмы крови (негемоглобиновое, транспортное железо, находящееся в соединении с ᵦ-глобулином — трансферрином) не более 0,1 %. При распаде гемоглобина образуется белок — глобин и железосодержащий гематин. Освободившееся железо превращается в окисную форму, со­единяется с сывороточным белком ᵦ-глобулином), образуя трансферрин, который транспортируется в костный мозг. Здесь из трансферрина железо передается ферритину ретикулярных клеток костного мозга, откуда он поступает в цитоплазму эритробластов и используется для образования гемоглобина. Часть железа депо­нируется в печени и селезенке в виде ферритина и гемосидерина.

Из организма железо выводится с калом, мочой и желчью, а у лактирующих животных — с молоком.

Количество железа в сыворотке крови определяют бета-фенантролиновым методом.

 

Гиперсидеремия возникает при избытке железа в организме, гемолитической анемии, циррозе печени и хроническом гепатите, гемолитической и паренхиматозной желтухах, бронхопневмонии; гипосидеремия — при недостаточном поступлении железа с корма­ми, при острых и хронических кровопотерях, беременности, ост­рых инфекционных болезнях, анемиях, уремии, сердечной недо­статочности, бронхите, бронхиальной астме.

Медь. Медь входит в состав некоторых ферментов (цитохромоксидазы, уриказы, церулоплазмина), участвует в обмене гормо­нов, белков, углеводов, необходима для кроветворения, участвует в некоторых иммунологических процессах, влияет на деятель­ность нервной и сердечно-сосудистой систем, воздействует на процессы роста и размножения. При недостатке меди у крупного рогатого скота развивается лизуха, у овец — атаксия.

Медь всасывается в кишечнике; накапливается в печени, селе­зенке, щитовидной железе и почках; выделяется преимуществен­но толстым кишечником, с желчью, молоком и мочой.

В плазме крови большая часть меди (90 %) связана с белками в виде церулоплазмина, незначительное количество ее содержится в свободном состоянии; в эритроцитах имеется комплексен меди с белками — гемокупреин.

Содержание меди в крови (см. табл. 19) устанавливают спект-рофотометрически или на атомно-абсорбционном спектрофото­метре, а также с диэтилдитиокарбаматом натрия.

Гиперкупремия отмечается в острый период инфекций, протека­ющих с лихорадкой и распадом клеточных элементов, при заболе­ваниях печени, гемобластозах, анемиях, злокачественных образо­ваниях. Гипокупремия — при анемиях у молодняка.

Кобальт. Необходим для микробного синтеза витамина В₁₂ (ци-анокобаламина) у жвачных в рубце, а у моногастричных в толстом кишечнике. Кобальт влияет на отложение фосфора в костях, сти­мулируя активность щелочной фосфатазы; участвует в белковом обмене; усиливает тканевое дыхание; стимулирует распад углево­дов; активирует многие ферменты (рибофлавинкиназу, малатде-гидрогеназу, пируватдекарбоксилазу), усиливает синтез нуклеино­вых кислот и мышечных белков; повышает ассимиляцию азота и основной обмен.

Кобальт всасывается в кишечнике в виде ионов Со⁺⁺ и с вита­мином В₁₂; депонируется печенью и мышцами, накапливается в тимусе, гипофизе, щитовидной и поджелудочной железах, селе­зенке. Выделяется с мочой и молоком.

В крови кобальт находится в белковосвязанной форме и в виде витамина В₁₂.

Определение количества кобальта в крови (см. табл. 19) прово­дят спектрофотометрически и на атомно-абсорбционном спектро­фотометре.

Гипокобалыпоз — возникает при недостаточном поступлении с кормами (эндемический гипокобальтоз, сухотка, «болотная» бо­лезнь).

Селен. Обладает антиоксидантным действием, участвует в окислительном фосфорилировании, стимулирует иммунобиоло­гическую активность, зрительную чувствительность.

Определение содержания селена в крови проводят колориметрически с диаминобензидином по Ковальскому и Гололобову, а также спектрофотометрически.

У крупного рогатого скота в крови содержится 8—11 мкг/100 мл селена (или 1,0—1,4мкмоль/л, а у овец —8—12 мкг/100 мл (или 1,0—1,5мкмоль/л). Для пересчета количества селена в единицы СИ мкг/100 мл умножают на коэффициент 0,127.

При недостатке в организме селена и витамина Е у животных развивается беломышечная болезнь, дистрофия печени, энцефа-ломаляция и экссудативный диатез у цыплят. Избыточное поступ­ление селена с кормами вызывает алкалоз, «вертячку» у крупного рогатого скота и овец.

Связанный с белками йод.Йод входит в состав гормонов щито­видной железы, регулирующих основной обмен веществ. Всасыва­ется йод в передних частях тонкого кишечника. Накапливается в щитовидной железе и мышцах. Выделяется преимущественно (70—80 %) через почки, слюнные и потовые железы, у лактирую-щих животных — с молоком.

В сыворотке крови у крупного рогатого скота белковосвязанного йода 4—5 мкг/100 мл (315—394 нмоль/л), а у овец — 4—8 мкг/100 мл (315—630 нмоль/л). Для перечисления в единицы СИ мкг/100 мл умножают на коэффициент 78,795.

При недостаточном поступлении йода у животных развивается энзоотический зоб, у коров снижается плодовитость, у овец отме­чают отставание в росте, у птиц снижается яйценоскость.

Общий белок и белковые фракции.В сыворотке крови из сухого остатка больше всего содержится белка, который состоит из аль­буминов и глобулинов (в плазме имеется еще фибриноген). Альбу­мины и фибриноген, большая часть глобулинов (в основном а- и ᵦ-глобулины и некоторое количество у-глобулинов) синтезируются в печени; у-глобулины в основном вырабатываются плазматичес­кими клетками и Б-лимфоцитами.

Сывороточные белки играют существенную роль в поддержа­нии вязкости крови, коллоидно-осмотического давления, транс­порте многих веществ, которые, соединяясь с белками, переносят­ся к тканям (альбумины переносят витамины С, К, РР, антибио­тики, промежуточные продукты обмена; транспортируют жирные кислоты, соли желчных кислот, желчные пигменты, гаматин, ле­карственные препараты, каротин, витамины А, D, Е, К, В₁₂, желе­зо, медь, гемоглобин), в регуляции постоянства рН крови (белко­вая буферная система), свертывании крови, иммунных процессах (иммуноглобулины), стабилизации уровня катионов крови.

Количество общего белка в сыворотке крови определяют рефрактометрически или более точным биуретовым методом. Для ис­следования белковых фракций сыворотки проводят электрофорез на бумаге, позволяющий выделить 4—5 фракций: альбумины, а-, ᵦ- и у-глобулины. Электрофорезом в агаровом, крахмальном или полиакриламидном геле можно выявить большее число фракций.

Наибольшее количество их удается определить с помощью имму-ноэлектрофореза.

Гипопротеинемия развивается за счет уменьшения количества альбуминов и возникает при длительном недокорме, низком со­держании белка в рационе, несбалансированном по аминокис­лотному составу; при плохом усвоении протеина, хроническом нарушении желудочно-кишечного тракта, недостатке углеводов, макро- и микроэлементов, витаминов (А, Е и др.); при алиментар­ной остеодистрофии, нефрозе и нефрите (вследствие протеинурии); хроническом гепатите и циррозе печени (снижение синтеза белков); при кровотечениях, гидремии, абсцессах, злокачествен­ных новообразованиях, лихорадочных состояниях и интоксика­циях.

Гиперпротеинемия возникает при белковом перекорме (высоко-концентратном типе кормления), избытке переваримого протеина и недостатке углеводов, каротина, нарушении количественного соотношения кальция и фосфора и недостатке витамина D, ост­ром гепатите, дистрофии печени (за счет повышения глобулинов и снижения альбуминов), тяжелых формах диареи, дегидратации.

Гипоальбуминемия возникает при диффузном циррозе печени, голодании, кахексии, инфекционных болезнях, воспалительных процессах, острых пневмониях и бронхопневмониях, гемобластозе, кетозах, диспепсии, А-гиповитаминозе, миоглобинурии, не­фрозах, нефрите, нефросклерозе, токсических повреждениях пе­чени, опухолях с метастазами. Гиперальбуминемию отмечают при дегидратации, в начальной стадии пневмонии, при полиартритах, инфекционных болезнях, сепсисе, злокачественных новообразо­ваниях.

Увеличение количества а-глобулинов происходит при пневмо­нии, острых полиартритах, острых инфекционных болезнях, сеп­сисе, эндокардите, холецистите, цистите и пиелите, нефрозах, нефрите, нефросклерозе, кахексиях, злокачественных опухолях с метастазами, обтурационной желтухе.

Увеличение содержания у-глобулинов бывает при нефрозе, не­фрите, нефросклерозе, кахексии, злокачественных новообразова­ниях, полиартрите, обтурационной желтухе.

Гипогамма-глобулинемию регистрируют при нефрозе, нефрите, нефросклерозе, кахексии; гипергамма-глобулинемию — при по­здних стадиях пневмоний, полиартрите, туберкулезе легких, ост­рых инфекционных болезнях, хроническом эндокардите, холеци­стите, уроцистите и пиелите, злокачественных новообразованиях, гепатите, гемолитических процессах, гемобластозах, циррозе пе­чени, обтурационной желтухе.

 

Из белков плазмы наиболее изучены гаптоглобин (из а₂-глобу-линовой фракции), который способен соединяться с гемоглоби­ном, предупреждая его потерю с мочой; трансферрин, образую­щий с железом комплексное соединение; церулоплазмин, имею­щий в своем составе медь; С-реактивный белок, который появля­ется при воспалительных и некротических процессах в острый период заболевания; криоглобулин, появляющийся при нефрозе, циррозе печени, гемобластозе; интерферон — специфический бе­лок, синтезируемый в клетках под влиянием вирусов; иммуногло­булины, входящие в у-глобулиновую фракцию (пять классов им­муноглобулинов: lgG, lgМ, lgА., lgО, lgЕ).

Глюкоза.Углеводы играют важную роль в энергетическом ба­лансе организма. Основной источник энергии в организме — глю­коза.

Углеводы кормов в кишечнике моногастричных животных рас­щепляются до моносахаридов (глюкозы, фруктозы и галактозы). Фруктоза и галактоза в стенке кишечника под влиянием фосфатазы фосфорилируются и превращаются в глюкозу. Глюкоза всасыва­ется в кровь и поступает в ткани; избыток ее откладывается в пе­чени (в виде гликогена), мышцах и других тканях.

У жвачных большая часть углеводов в преджелудках ферменти­руется до летучих жирных кислот (ЛЖК) и в следующие отделы пищеварительного тракта поступает небольшое количество угле­водов; образовавшаяся в кишечнике глюкоза всасывается в тон­ком кишечнике и немного в толстом. В рубце всасываются ЛЖК и небольшое количество глюкозы. Поэтому пополнение их организ­ма глюкозой осуществляется в результате глюконеогенеза из ЛЖК в печени и частично в стенке кишечника. Наиболее выраженной глюкогенностью обладает пропионовая кислота.

Регуляцию уровня глюкозы крови (гликемии) осуществляют поджелудочная железа (инсулин, глюкагон), гипоталамус, гипо­физ (аденокортикотропный гормон), надпочечники (глюкокорти-костероиды, адреналин, норадреналин), щитовидная железа (тиреоидные гормоны), симпатический отдел вегетативной нервной системы.

Количество глюкозы в крови определяют ортотолуи-липоным методом, методом Сомоджи.

Контрольные вопросы и задания

1.      Каковы правила получения и хранения крови, плазмы и сыворотки крови?

2.      Назовите основные физические показатели крови животных разных видов.

3.      Перечислите основные биохимические показатели крови.

4.      Каковы морфологические показатели крови животных разных видов?

5.      Изложите основные виды изменений морфологического состава крови.

6.      Перечислите основные виды гемобластозов (лейкозов, ретикулезов) животных и их морфологические признаки.